epa1623方法的操作简介
“epa1623方法是由美国国的用于测定水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫的标准方法。概况地说,该方法分为三部。,水样进行过滤收集水中的乱囊和孢囊;第二,利用磁分离来纯化过滤样品;第三,对纯化的样品通过荧光显微镜法来监测“两虫的数量。
1、水样过滤
将卵囊、孢囊及其他无知收集在过滤器上。该过滤器可用于实验室批量水样的过滤,也可以用于野外现场水样的过滤。过滤后的囊式滤器,成都两虫质控试剂,用洗脱剂将拦截在滤囊上的颗粒物震荡洗脱下来,两虫质控试剂厂家,并将洗脱物收集在一个250毫升的离心管中。
两虫检测囊式过滤器:水样过滤囊式滤器安装好,过滤器的滤囊用震荡器进行洗脱分离。
特点
1um孔径的改良滤膜能截留两虫。
---使用的设计避免了因其他因素的污染而造成的实验结果误差。
于源水与自来水的隐孢子虫与贾第鞭毛虫的浓缩与回收,使用简单、方便、快捷。
两虫检测的---性、稳定性、安全性、---性 1. 过滤步骤回2. 淘洗步骤回收率 ***80% 3. ims分离步骤回收率 ***90%4. 总回收率(过滤、淘洗、磁珠分离、染色)*** 50%5. 检测结果相对标准差 ≤ 20 %6. 镜检率:贾第鞭毛虫孢囊100%检出,隐孢子虫卵囊100%检出7. 检测可处理高浊度水样:可达100(ntu)8. 提供预制的阳性对照玻片:该预制的载玻片供随时反复多次使用,无需现场制片,---了操作人员的安全
磁分离
离心管中的洗脱物通过离心分离作用,使颗粒物沉淀在离心管底部,同时去掉离心管中的上清液。将离心后的含有卵囊和孢囊的沉淀物用纯水混匀,并向其中加入dynal公司的磁分离试剂(dynabeads gc-combo试剂盒)进行磁分离。具体做法是:首先用带有(抗隐孢子虫和贾第鞭毛虫)的特殊磁珠捕获沉淀物的卵囊和孢囊;其次通过dynal公司的mpc-s磁粒浓缩器将捕获有卵囊和孢囊的磁珠吸附在试管壁上,去掉未被吸附在试管壁上含杂质的液体,以达到卵囊和孢囊从沉淀物中分离出来的目的;再次加入---将管壁上捕获有卵囊和孢囊的磁珠进行洗涤,以使卵囊和孢囊从磁珠上解离出来;后将含有卵囊和孢囊的纯化液转移至井形载玻片上进行制片。
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