每批试剂需做验证检验:向一份100ml无菌水样中接种含有粪大肠菌的质控样标准菌株,按照上述定量检测步骤操作观察结果,看结果是否在其范围内。
9 注意事项
9.1 如果水样品有背景颜色,需做一个空白试验,大肠菌群检测试剂,与标准检测结果相比较。
9.2 只可使用灭菌水,不含缓冲液的水,不含氧化剂的水进行样品稀释。
9.3 此法所用试剂只用于常规水样,不可用于浓缩水样。
9.4 如水样中含有过多的氯,则加入试剂可能显蓝光,成都检测试剂,则该水样不可用此方法。
9.5 此法无需在无菌室中进行,colitag检测试剂,但操作过程因避免微生物污染。
9.6 检测使用过的定量盘应灭菌后弃去。把约30个定量盘放入防爆袋中,用绳子松松的扎住袋口,放入高压蒸汽灭菌锅中,121℃高压灭菌20min后取出,在防爆袋上注明“生物垃圾已灭菌”方可弃去。
大肠菌群检测操作步骤
1 水样稀释
检测所需水样为100ml。若水样污染---,可对水样进行稀释。取10 ml水样加入到90 ml无菌水中,粪大肠检测试剂,---时可加大稀释度,水样按照10倍逐级稀释。
2 定性反应
用100 ml的无菌稀释瓶量取100 ml水样,加入培养基粉末,混摇均匀使之完全溶解后,放入44.5℃的培养箱内培养24h。
3 51孔定量盘法
3.1 用100 ml的无菌稀释瓶量取100 ml水样,加入培养基粉末,混摇均匀使之完全溶解。
3.2 将前述100ml水样全部倒入51孔无菌定量盘内,以手抚平定量盘背面以赶除孔气泡,然后用程控定量封口机封口。放入44.5℃的培养箱内培养24h。
3.3 无需稀释检测范围:1-200mpn/100ml粪大肠菌群(耐热大肠菌群)
4 97孔定量盘法
4.1 将100ml水样全部倒入97孔无菌定量盘内,其余步骤与6.3.1、6.3.2条款相同。
4.2 无需稀释检测范围:1-2419mpn/100ml粪大肠菌群(耐热大肠菌群)
粪大肠菌群快速检测 (酶底物法)
1.适用范围
本方法适用于生活饮用水及其水源水、地表水、污水、废水等水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)的定性检测、定量检测
2.方法原理
固定底物酶底物法(dst)采用大肠菌群---能产生β-半乳糖苷酶分解onpg使培养液呈黄色的原理,来判断水样中是否含粪大肠菌群(耐热大肠菌群),粪大肠的培养温度是44.5℃。
3.仪器设备
3.1 程控定量封口机
3.2电热恒温培养箱
3.3 冰箱
3.4 51孔定量盘、97孔定量盘
3.5 100ml无菌水样瓶
3.6 高压蒸汽灭菌锅
3.7 干热灭菌器
3.8 量筒
3.9 吸管
3.10 试管
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